Трава звіробою містить речовини дубильні (10-12 %), флавоноїди (гіперозид, рутин, кверцитрин, мірицетин, лейкоантоціани), сапоніни, барвники (гіперицин – 0,1-0,4 %, псевдогіперицин, гіперин, франгулаемодинантранол), олію ефірну (0,2-0,3 %), речовини смолисті (17 %), каротин, кислоту аскорбінову.

Звіробою лікувальні властивості забезпечують ефективність ліків на його основі в лікуванні різних патологій і дисфункцій організму. Препарати з цієї рослини застосовують в лікуванні гепатитів і застійних процесів у печінці та жовчному міхурі, включаючи дискінезії, холецистити, гастрити, хронічний коліт. Вживають траву звіробою окремо або в комбінації з іншими рослинами при секреторній недостатності. Вітрогінні властивості дозволяють використовувати звіробій при метеоризмі та розладах шлунково-кишкового тракту. При порушенні функціональності нирок, пов'язаних із затримкою рідини в організмі, звіробій виступає як діуретик. Дана властивість дозволяє застосовувати його як допоміжний засіб при сечокам'яній хворобі.
Має в’яжучу, протизапальну і деяку протимікробну дію, що сприяє регенерації тканин, помірно впливає на жовчовиділення, збуджує шлункову секрецію і т. ін.

Заготівля трави проводиться в суху ясну погоду, щоб уникнути псування сировини від вологи. Готовність рослини до збору визначають за станом плодів, які повинні бути незрілими. Для заготівлі зрізають верхню частину рослини довжиною не більше 25-30 см. Зрізають її за допомогою ножа або секатора.
Зібрану сировину сушать під навісом або на горищі при температурі, яка не перевищує 40 ℃. Для цього траву можна розкладати тонким шаром на папері або тканині чи пов'язувати в пучки. Готовність сировини визначається за її ламкістю. Зберігати її можна 3 роки. 
З лікувальною метою використовують траву рослини, зібрану в період цвітіння звіробою.

Звіробій продірявлений, або звичайний (заяча кров, кровавчик, хворобій) належить до лікарських рослин. Трава звіробою застосовується як натуральний антимікробний, жовчогінний, терпкий засіб.

Препарати звіробою протипоказані людям з підвищеною збудливістю центральної нервової системи. Їх не можна вживати дітям до 12 років і тим, хто страждає алергією на будь-який компонент у складі трави. Препарати при передозуванні можуть викликати світлобоязнь і безсоння. Якщо разом зі звіробоєм пацієнт приймає лікарські засоби, йому необхідно обов'язково порадитися з лікарем, оскільки рослина може знижувати ефективність деяких із них. Оскільки у складі препаратів звіробою присутні сильнодіючі речовини, їх не можна приймати в період вагітності та лактації.

Звіробій готують у вигляді настоїв для обробки рота при стоматитах, гінгівітах, кровоточивості ясен, запальних процесах. Відвар рослини дозволяє позбутися неприємного запаху з рота, усунути кровоточивість ясен. Він може застосовуватися як профілактичний засіб для запобігання пародонтиту.
Здатність загоювати рани та дезінфікувати їх дозволяє використовувати компреси зі звіробою для лікування інфікованих ран. Вони можуть застосовуватися для кровоточивих ран, оскільки у складі трави присутні в'яжучі інгредієнти.
У траві рослини містяться дубильні речовини, які обумовлюють кровоспинні властивості лікарських засобів з неї. Також звіробій включає флавоноїди і сапоніни, каротин, смоли, аскорбінову кислоту й ефірні олії.Поєднання перерахованих речовин забезпечує протизапальну і легку протимікробну дію разом зі здатністю подразнювати стінки слизової, що стимулює секрецію внутрішніх органів.

Застосування звіробою в косметології обумовлено антимікробними та протизапальними властивостями, а також здатністю загоювати рани. Його використовують для лікування вугрового висипу і нормалізації роботи сальних залоз, для запобігання старінню шкіри. Корисний фітопрепарат при засмазі, тому що надає їй стійкості. Звіробій зміцнює волосся і може покращувати відтінок світлого волосся, надаючи йому золотистого відливу.